Robust-Lumi? ECL 是一款應用于 Western blotting 檢測的超靈敏、低背景的化學發光辣根

過氧化物酶底物。樣品制備，轉膜及抗體孵育等信號檢測前環節操作與常規 Western blotting 步驟

一致。GeneCodex 公司提供 3 種劑型：常規劑型 Robust-Lumi? ECL（A 液和 B 液）以及檢測

靈敏度更高的 Robust-Lumi? ECL Advanced（增強型）和 Robust-Lumi? ECL Platinum（超敏型）。

Robust-Lumi? ECL 使用步驟：

1. 常規 Western blotting 蛋白樣品制備定量、電泳、轉膜。

2. 將蛋白樣品轉移至 PVDF 或 NC 膜上，室溫封閉 1 小時。

3. 室溫下，一抗孵育轉印膜 1 小時，搖床輕搖使抗體孵育均勻。

4. 洗膜 3 次，每次 5 分鐘。

5. 室溫下，二抗孵育轉印膜 1 小時，搖床輕搖使抗體孵育均勻。

6. 洗膜 3 次，每次 5 分鐘。

7. 將 Robust-Lumi? ECL 試劑盒中的 A 液和 B 液以（1︰1）等體積混勻，將混勻后的

ECL 檢測工作液充分浸潤完成抗體孵育的蛋白轉印膜（約 0.1 mL/cm2），反應 2 分鐘，

吸出反應液，用保鮮膜覆蓋濕潤的轉印膜，暗室內曝光壓片或者使用 CCD 成像。

COA-P021